1.Ki sa ki kilti selil?
Kilti selil refere a retire selil nan bèt oswa plant ak Lè sa a, grandi yo nan yon anviwònman favorab atifisyèl.Selil yo ka pran dirèkteman nan tisi a epi yo ka kraze pa mwayen anzimatik oswa mekanik anvan kiltivasyon, oswa yo ka sòti nan liy selil etabli oswa liy selil yo.
2.Ki sa ki kilti prensipal?
Kilti prensipal refere a etap nan kilti apre selil yo separe ak tisi a epi pwopagasyon nan kondisyon apwopriye jiskaske yo okipe tout substrats ki disponib (ki se, rive nan konfluans).Nan etap sa a, selil yo dwe subcultured lè yo transfere yo nan yon nouvo veso ki gen mwayen kwasans fre pou bay plis espas pou kwasans kontinye.
2.1 Liy selilè
Apre premye subkilti a, kilti prensipal la rele yon liy selilè oswa yon subclone.Liy selilè ki sòti nan kilti prensipal yo gen yon lavi limite (sa vle di yo limite; gade anba a), epi pandan y ap pase, selil yo ki gen pi gwo kapasite kwasans domine, sa ki lakòz yon sèten degre jenotip nan popilasyon an ki konsistan avèk fenotip.
2.2 Souch selilè
Si yon sou-popilasyon nan yon liy selil pozitivman chwazi nan kilti a pa klonaj oswa kèk lòt metòd, liy selil la ta vin yon souch selil.Souch selil yo anjeneral jwenn chanjman jenetik adisyonèl apre liy paran an kòmanse.
3.Liy selilè limite ak kontinyèl
Selil nòmal yo anjeneral divize sèlman yon kantite limite nan fwa anvan yo pèdi kapasite nan pwopagasyon.Sa a se yon evènman jenetikman detèmine ki rele senesans;liy selilè sa yo rele liy selil fini.Sepandan, kèk liy selil vin imòtèl atravè yon pwosesis ki rele transfòmasyon, ki ka rive espontaneman oswa ki ka pwovoke pa pwodui chimik oswa viris.Lè yon liy selil fini sibi transfòmasyon epi li genyen kapasite pou divize endefiniman, li vin tounen yon liy selil kontinyèl.
4.Kilti kondisyon
Kondisyon kilti yo nan chak kalite selil yo trè diferan, men anviwònman an atifisyèl pou kiltive selil yo toujou konpoze de yon veso apwopriye, ki gen sa ki annapre yo:
4.1 Substra oswa mwayen kilti ki bay eleman nitritif esansyèl (asid amine, idrat kabòn, vitamin, mineral)
4.2 Faktè kwasans
4.3 Òmòn
4.4 Gaz (O2, CO2)
4.5 Anviwònman fizik ak chimik reglemante (pH, presyon osmotik, tanperati)
Pifò selil yo depann de anchorage epi yo dwe kiltive sou yon substra solid oswa semi-solid (kilti aderan oswa monokouch), pandan ke lòt selil ka grandi k ap flote nan mwayen an (kilti sispansyon).
5.Cryopreservation
Si gen selil depase nan subculture a, yo ta dwe trete ak yon ajan pwoteksyon apwopriye (tankou DMSO oswa gliserin) epi estoke nan yon tanperati ki anba a -130 ° C (kryokonservasyon) jiskaske yo bezwen.Pou plis enfòmasyon sou subkilti ak kriyokonservasyon selil yo.
6.Mòfoloji selil nan kilti
Selil nan kilti yo ka divize an twa kategori debaz ki baze sou fòm yo ak aparans yo (sa vle di mòfoloji).
6.1 Fibroblasts selil yo se bipolè oswa miltipolè, yo gen yon fòm long, epi yo grandi tache ak substra a.
6.2 Selil epitelyal yo poligonal, yo gen yon gwosè pi regilye, epi yo tache ak matris la nan fèy diskrè.
6.3 Selil ki sanble ak lenfoblast yo esferik epi anjeneral grandi an sispansyon san yo pa atache ak sifas la.
7.Aplikasyon nan kilti selil
Kilti selil se youn nan zouti prensipal yo itilize nan selil ak byoloji molekilè.Li bay yon sistèm modèl ekselan pou etidye fizyoloji nòmal ak byochimik selil yo (tankou rechèch metabolik, aje), efè dwòg ak konpoze toksik sou selil yo, ak mutagenèz ak efè kanserojèn.Li se tou itilize pou tès depistaj dwòg ak devlopman ak manifakti gwo echèl nan konpoze byolojik (tankou vaksen, pwoteyin ki ka geri).Avantaj prensipal lè w sèvi ak kilti selilè pou nenpòt nan aplikasyon sa yo se konsistans ak repwodibilite rezilta yo ki ka jwenn lè l sèvi avèk yon pakèt selil klone.
Tan poste: Jun-03-2019