Kontaminasyon nan kilti selil yo ka fasilman vin pwoblèm ki pi komen nan laboratwa kilti selil yo, pafwa sa ki lakòz konsekans grav anpil.Kontaminan kilti selil yo ka divize an de kategori, kontaminan chimik tankou mwayen, serom ak enpurte dlo, endotoksin, plastifyan ak detèjan, ak kontaminan byolojik tankou bakteri, mwazi, ledven, viris, enfeksyon kwa mycoplasmas.Kontamine pa lòt liy selilè.Malgre ke li enposib pou elimine kontaminasyon konplètman, frekans ak gravite li yo ka redwi lè yo byen konprann sous li yo epi swiv bon teknik aseptik.
1.Seksyon sa a esplike kalite prensipal kontaminasyon byolojik yo:
Kontaminasyon bakteri
Kontaminasyon mwazi ak viris
Mikoplasma kontaminasyon
Kontaminasyon ledven
1.1Kontaminasyon bakteri
Bakteri yo se yon gwo gwoup mikwo-òganis sèl selil omniprésente.Yo anjeneral jis kèk mikron an dyamèt epi yo ka vini nan yon varyete fòm, ki soti nan esfè baton ak espiral.Akòz omniprésente yo, gwosè, ak to kwasans rapid, bakteri, ansanm ak ledven ak mwazi, se kontaminan byolojik ki pi komen nan kilti selil yo.
1.1.1 Deteksyon kontaminasyon bakteri
Kontaminasyon bakteri fasil detekte pa enspeksyon vizyèl nan kilti a nan kèk jou apre li vin enfekte;
Kilti ki enfekte anjeneral parèt twoub (sa vle di, twoub), pafwa ak yon fim mens sou sifas la.
Gout toudenkou nan pH mwayen kilti a tou souvan rankontre.
Anba yon mikwoskòp ki pa gen anpil pouvwa, bakteri yo parèt tankou ti granules k ap deplase ant selil yo, epi obsèvasyon anba yon mikwoskòp gwo pouvwa ka rezoud fòm bakteri endividyèl yo.
1.2 Mwazi ak kontaminasyon viris
1.2.1 Kontaminasyon mwazi
Mwazi yo se mikwo-òganis ekaryotik nan wayòm chanpiyon an ki grandi nan fòm filaman miltiselilè yo rele hyphae.Rezo konjonktif filaman miltiselilè sa yo gen nwayo jenetikman idantik yo rele koloni oswa miselyòm.
Menm jan ak kontaminasyon ledven, pH kilti a rete estab pandan premye faz kontaminasyon an epi apre sa ogmante rapidman kòm kilti a vin pi grav enfekte epi li vin twoub.Anba mikwoskòp, miselyòm se nòmalman filaman, pafwa kòm grap dans nan espò.Espò yo nan anpil mwazi ka siviv nan anviwònman trè difisil ak inospitalye pandan faz andòmi yo epi yo aktive sèlman lè kondisyon yo kwasans apwopriye yo rankontre.
1.2.2 Kontaminasyon viris
Viris yo se ajan enfektye mikwoskopik ki pran sou machin selil lame a pou repwodiksyon.Gwosè piti anpil yo fè yo difisil pou detekte nan kilti ak retire nan reyaktif yo itilize nan laboratwa kilti selil yo.Piske pifò viris gen kondisyon trè sevè pou lame yo, anjeneral yo pa afekte kilti selil espès lòt pase lame a.
Sepandan, itilizasyon kilti selil ki enfekte ak viris ka reprezante yon gwo risk pou sante pèsonèl laboratwa a, sitou si selil imen oswa selil primat yo grandi nan laboratwa a.
Enfeksyon viral nan kilti selil yo ka detekte pa mikwoskòp elèktron, imunostaining ak yon seri antikò, ELISA, oswa PCR ak primè viral apwopriye.
1.3 Kontaminasyon Mycoplasma
Mikoplasm yo se bakteri senp san mi selil, epi yo panse yo se pi piti òganis ki replike tèt yo.Akòz gwosè ekstrèmman ti yo (anjeneral mwens pase 1 mikron), mycoplasma difisil pou detekte jiskaske yo rive nan dansite trè wo epi lakòz kilti selil yo deteryore;Jiska lè sa a, anjeneral pa gen okenn siy evidan nan enfeksyon.
1.3.1 Deteksyon kontaminasyon mycoplasma
Gen kèk mikoplasm ki ap grandi dousman ki ka pèsiste nan kilti san yo pa lakòz lanmò selil, men yo chanje konpòtman ak metabolis selil lame yo nan kilti yo.
Enfeksyon kwonik mycoplasma ka karakterize pa pousantaj pwopagasyon selil redwi, diminye dansite saturation ak aglutinasyon nan kilti sispansyon.
Sepandan, sèl fason serye pou detekte kontaminasyon mycoplasma se teste kilti a regilyèman lè l sèvi avèk tach fliyoresan (pa egzanp, Hoechst 33258), ELISA, PCR, imunostaining, otoradiografi, oswa tès mikwòb.
1.4 Kontaminasyon ledven
Lev yo se yon sèl selil ekaryot nan wayòm chanpiyon an, ki varye nan gwosè soti nan kèk mikron (anjeneral) a 40 mikron (raman).
1.4.1Deteksyon kontaminasyon ledven
Menm jan ak kontaminasyon bakteri, kilti ki kontamine ak ledven ka vin twoub, sitou si kontaminasyon an nan yon etap avanse.PH nan kilti ki kontamine ak ledven chanje anpil jiskaske kontaminasyon an vin pi grav, nan ki etap pH la anjeneral ogmante.Anba mikwoskòp la, ledven parèt tankou yon patikil ovoid oswa esferik epi li ka pwodwi pi piti patikil.
2.Cross enfeksyon
Byenke pa komen tankou kontaminasyon mikwòb, anpil kontaminasyon kwa anpil nan liy selil HeLa ak lòt liy selil k ap grandi rapid se yon pwoblèm ki klèman defini ak konsekans grav.Jwenn liy selilè nan bank selil ki gen bon repitasyon, tcheke regilyèman karakteristik liy selil yo, epi sèvi ak bon teknik aseptik.Pratik sa yo pral ede w evite kwa-kontaminasyon.Anprent ADN, kariotip ak izotip ka konfime si gen kwa-kontaminasyon nan kilti selil ou a.
Byenke pa komen tankou kontaminasyon mikwòb, anpil kontaminasyon kwa anpil nan liy selil HeLa ak lòt liy selil k ap grandi rapid se yon pwoblèm ki klèman defini ak konsekans grav.Jwenn liy selilè nan bank selil ki gen bon repitasyon, tcheke regilyèman karakteristik liy selil yo, epi sèvi ak bon teknik aseptik.Pratik sa yo pral ede w evite kwa-kontaminasyon.Anprent ADN, kariotip ak izotip ka konfime si gen kwa-kontaminasyon nan kilti selil ou a.
Lè poste: Feb-01-2023